DPBS в сравнении с PBS
PBS, или фосфатно-буферный солевой раствор, и фосфатно-буферный солевой раствор Дульбекко (DPBS) — это буферные солевые растворы, используемые в биологических исследованиях. PBS и DPBS используются в исследованиях, связанных с клетками. Концентрация ионов и осмолярность раствора изотоничны, то есть совместимы с человеческим организмом. Буфер способствует обеспечению и сохранению стабильного pH 7,2-7,6.
Между PBS и DPBS нет существенной разницы. Оба они содержат фосфат натрия, хлорид натрия и, при необходимости, фосфат калия и хлорид калия. Другие препараты, такие как DPBS, могут содержать или не содержать кальций и магний. PBS и DPBS имеют множество применений, поскольку они не опасны для клеток. И PBS, и DPBS можно использовать для промывания инструментов или контейнеров, загрязненных клетками. Кроме того, оба они могут использоваться для разбавления веществ. Молекулы воды внутри разбавителей, таких как белок, останавливаются и высыхают. Вода, соединяясь с веществом, удерживает вещество от конформационных изменений, таких как денатурация. Растворы кальция и магния могут сдерживать активность трипсина. В эллипсометрии адсорбция белка может быть измерена путем снятия базисного спектра с использованием PBS.
Фосфатно-буферный солевой раствор с добавками, такими как ЭДТА, может быть использован для разделения связанных клеток. При добавлении цинка, двухвалентного металла, в PBS образуется осадок, поэтому его нельзя добавлять для разъединения клеток. Вместо цинка в таких ситуациях используется буфер Гуда.
Фосфатно-буферный физраствор и фосфатно-буферный физраствор Дульбекко готовят различными способами. Один из способов приготовления заключается в растворении 800 г. хлорида натрия, 20 г. хлорида калия, 2 молекул воды, 24 г. фосфата калия и 144 г. фосфата натрия в 8 л. дистиллированной воды. В результате получится 10 л 10-кратного PBS. При приготовлении буферных растворов непосредственно измеряйте pH PBS с помощью pH-метра. pH раствора регулируется с помощью гидроксида натрия или соляной кислоты. Фосфатный забуференный физраствор в качестве разбавителя готовится с конечной концентрацией 10 мМ фосфата, 137 мМ хлорида натрия, 2,7 мМ хлорида калия и pH 7,4. Фрич, Сэмбрук и Маниатис в своей книге «Молекулярное клонирование» предлагают свой способ приготовления буферных растворов. Соответственно, для приготовления литра 1x PBS начните с 800 мл дистиллированной воды. Включите 8 г. хлорида натрия, а также 0,2 г. хлорида калия. Затем добавьте 1,44 г. фосфата натрия и 0,24 г. фосфата калия. Добавьте соляную кислоту, чтобы отрегулировать pH до 7,4. Чтобы получить 1 литр PBS, добавьте еще дистиллированной воды до уровня 1 литра. Разделите полученный раствор на аликвоты и используйте автоклав для стерилизации раствора. Настройте автоклав на 121˚ C и автоклавируйте его в течение 20 минут в жидкостном цикле. После этого храните раствор при комнатной температуре.
Хотя фосфатно-буферный физраствор и фосфатно-буферный физраствор Дульбекко готовятся разными способами, их содержимое остается неизменным. Поэтому, независимо от способа приготовления, результаты и применение остаются одинаковыми.
Резюме:
1.PBS, или фосфатный забуференный физраствор, и фосфатный забуференный физраствор Дульбекко (DPBS) — это забуференные физрастворы, используемые в биологических исследованиях.
2.Концентрация ионов и осмолярность раствора является изотонической, то есть совместимой с человеческим организмом. Буфер способствует обеспечению и сохранению стабильного рН 7,2-7,6.
3.Нет существенной разницы между PBS и DPBS. Оба они содержат фосфат натрия, хлорид натрия и, при необходимости, фосфат калия и хлорид калия. Другие препараты, такие как DPBS, могут содержать или не содержать кальций и магний.
4.И PBS, и DPBS можно использовать для промывания инструментов или контейнеров, загрязненных клетками. Кроме того, оба они могут быть использованы для разбавления веществ. Молекулы воды внутри разбавителей, таких как белок, останавливаются и высыхают. Вода, соединяясь с веществом, удерживает его от конформационных изменений, таких как денатурация. Растворы кальция и магния могут сдерживать активность трипсина. В эллипсометрии адсорбция белка может быть измерена путем снятия базисного спектра с использованием PBS.
5.Фосфатно-буферный солевой раствор с добавками, такими как ЭДТА, может быть использован для разделения связанных клеток. При добавлении цинка, двухвалентного металла, в PBS образуется осадок, поэтому его нельзя добавлять для разъединения клеток. Вместо цинка в таких ситуациях используется буфер Гуда.
6.PBS и DPBS готовятся различными способами. Хотя фосфатный забуференный физраствор и фосфатный забуференный физраствор Дульбекко готовятся разными способами, их содержимое остается неизменным. Поэтому, независимо от способа приготовления, результаты и применение остаются одинаковыми.