GFP против YFP
GFP и YFP — два совершенно разных флуоресцентных белка, полученных из медузы Aequorea victoria. Многие морские организмы имеют похожие зеленые флуоресцентные белки, но GFP относится к белку, который был первоначально выделен именно из этой медузы. YFP является генетическим мутантом GFP.
GFP
GFP означает зеленый флуоресцентный белок. Основная характеристика зеленого флуоресцентного белка заключается в том, что при облучении синим ультрафиолетовым светом он проявляет зеленую флуоресценцию. GFP состоит из 238 аминокислот. Флуоресцентные белки имеют два пика — пик возбуждения и пик эмиссии. GFP имеет пик возбуждения на длине волны 395 нм, а пик эмиссии — на длине волны 509 нм. 509 нм в видимом спектре — это нижняя зеленая часть. Квантовый выход или QY зеленого флуоресцентного белка составляет 0,79. Квантовый выход относится к количеству раз, когда событие происходит, когда процесс, вызванный излучением, происходит на один фотон. В данном случае «событие» относится к испусканию фотонов.
GFP очень полезен в молекулярной и клеточной биологии. Он используется в качестве «репортера экспрессии». Репортерные гены — это гены, которые используются учеными и исследователями для присоединения к другому гену, который они изучают. Они помогают измерить и определить, экспрессирован ли ген популяцией организма или клеткой. Они также используются в качестве биосенсоров.
За открытие GFP и его разработку Роджер Тсьен, Осаму Шимомура и Мартин Чалфи получили Нобелевскую премию 2008 года.
YFP
YFP означает желтый флуоресцентный белок. Он является мутантом первоначально полученного зеленого флуоресцентного белка из медузы Aequorea Victoria. YPF также имеет два разных пика: пик эмиссии — 527 нм, а пик возбуждения — 515 нм. Применение YFP сходно или аналогично применению GFP в молекулярной биологии.
YFP имеет 3 улучшенные версии: Ypet, Citrine и Venus. Особенностью этих улучшенных версий является пониженная чувствительность к хлоридам и более быстрое созревание; они обладают повышенной яркостью за счет квантового выхода. Обычно они используются в качестве акцепторов для FRET-датчиков. FRET означает резонансный перенос энергии флуоресценции. Их также называют RET или EET, резонансный перенос энергии и электронный перенос энергии соответственно. Это механизм, который описывает перенос энергии между двумя хромофорами.
Резюме